透析法

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高蛋白结合药物ppb测定:动态透析法的原理及优势

测定化合物在生物基质中的游离分数有多种方法,如平衡透析法、超速离心法、超滤法等,其中平衡透析法是最常用的方法。 然而,只有当体系达到真正的平衡、化合物在生物基质中没有发生代谢或降解,且缓冲液中游离样品的浓度满足分析灵敏度的要求时,平衡透析法测试得到的fu才是可靠的。 图1. 平衡透析法的原理示意图[6] (a) 0时刻,将药物加入生物基质——血浆或脑匀浆中; (b) 经过4-6小时的透析后,体系无非特异性吸附,药物在膜两侧达到平衡的情形 ; (c) 体系存在非特异性吸附,化合物在膜两侧仍然可以达到平衡的情形。 对于高蛋白结合的化合物,往往需要很长的时间达到平衡,甚至在有些情形下达不到平衡,导致准确测定fu十分困难。

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